Теория и практика хроматографии

Часто получается так, что в подвижных фазах, используемых при хроматографии белков необходимо использовать компоненты поглощающие на длине волны детектирования.

Что делать когда хочется новый хроматограф- а нет денег- надо искать компроми́сс. Компромисc первый- имеем ЛХМ-80 и Кристалл2000М- берём ДТП от ЛХМ-80, перепаиваем и подводим к кабелю от ДТП Кисталла2000М- нужен лишний анализ- переключили кабель- получили анализ :-). А если нет лишнего ЛХМ-80? У нас на Кристалле камера сравнения можно сказать простаивает- а на ЛХМ-80 трудится- а если её использовать и на кристалле- вместо колонки сравнения ставим ещё один испаритель- и начинаем смотреть что получится. Сам пока не знаю- но комплект получил- постораюсь запечатлить процесс :-)

n/a
При включении модуля выполняется внутренняя диагностика электроники, результаты которой отображены на дисплее все ок, затем происходит Инициалиация carousels. затем на дисплее появляется ошибка
Plunger homing fault (0) ...?????? и инициализация прекращается и больше ничего не происходит ни тестирование , ни промывка , ничего не могу помогите!!!!!!!!!!!!!

Как известно, обязательным условием идентификации вещества в хроматографии является совпадение времени выхода пика с его стандартом.  Иначе или система нестабильна, или вещества в образце нет. Я тоже так думал, но оказывается бывают исключения. Так в нашу лабораторию поступила аналитическая колонка С18, на которой определяют содержание интерферона на разных стадиях его производства. Методика фармакопейная и годами используемая. Откалибровались по стандарту (1 точка)- все идеально. Разброс по площади меньше 1%, колебания времени тоже мизерные.

Однажды был какой-то на удивление дурацкий день: у меня 2 раза в моем присутствии при фильтрации забивался фильтр и мигом его срывало к чертовой матери, в результате чего ренатурат капал даже с потолка, еще у одного здорового парня вдруг кровь пошла носом ну и так по мелочи. А еще у одного хроматографиста метод, который он перенес уже на десяток с лишним хроматографов, по непонятным причинам ни как не хотел воспроизводиться на очередном ВЭЖХ-хроматографе.

Хроматограф очень капризная штука: подавай ему все самое лучшее. А еще ему нужно электричество, тоже очень хоршего качества и, желательно, без перебоев. Об этом как-то многие или забывают или не придают особого значения. Но до тех пор пока горячий петух не клюнет, ну или особо деятельный электрик ни кого не предупредив в щиток полезет:). Так что об бесперебойном питании хроматографа желательно беспокоиться заранее.

Повышение давления в ВЭЖХ системе достаточно часто встречающаяся проблема. Причины могут быть разные и все их можно разделить на две основные группы:

1. засорение жидкостного тракта хроматографа 

2. загрязнение хроматографической колонки.

Проблема попадания воздуха в систему в жидкостной хроматографии достаточно часто возникает из-за множества причин, часть из них, а также примеры их устранения, приведена тут. Но недавно я столкнулся с тем, что воздуха в системе не наблюдается, а УФ-детектор «рисует» характерную картинку засушенной колонки (Рисунки 1 и 2 ).

Аффинная хроматография основана на строго специфическом взаимодействии связанных с сорбентом антител с антигеном. Благодаря этому аффинная хроматография достаточно широко применяется в биотехнологии, т.к. позволяет достаточно легко извлекать минимальные количества целевого вещества из больших объемов, зачастую очень сложных растворов. Но такая специфичность имеет и свою обратную сторону. Так если в катионообменной хроматографии в 90% случаев используют SP или CM Sepharose, то практически для любого белка можно получить несколько аффинных сорбентов с разной емкостью, специфичностью и т.д.

          Наш сайт называется «Теория и практика хроматографии», но, как я отметил, проработав в нескольких лабораториях/производствах, теория и практика хроматографии, зачастую, «общаются» как достаточно дальние родственники: изредка перезваниваются.

Вопрос достаточно мало рассматриваемый в литературе, но тем не менее очень злободневный в жидкостной хроматографии. Так, например, за прошедший месяц я тем или иным образом сталкивался с этим раза 4. То клапан сработает с запозданием то сам напортачил. Засохшую колонку опять же полежавшую во время жары при +30 в «холодной» комнате пришлось восстанавливать. Работаю на хроматографе без ловушки, так что единичные пузыри бывает залетают.

Информация может оказаться полезной и не только начинающим.
http://www.meta-chrom.ru/support/skill-raising/
http://www.chromatec.ru/content/support/training.html
http://www.econova.ru/applications/education/education.php?set=school
Здесь представлены Российские производители хроматографического оборудования, далеко не все конечно.
Плохое оно или хорошее - решать вам. Мы не занимаемся рекламой, но хотим сказать, что в этих организациях работают настоящие профи и плохому не научат.

В мае в Центре Международной Торговли проводился 2-й Международный Конгресс-Партнеринг и Выставка по Биотехнологии, Биоэнергетике и Биоэкономике ЕвразияБИО. (Сайт: http://www.eurasiabio.ru/ ). Как говорят, конференция была достаточно интересной и познавательной, в том плане, что представляемые материалы в основной части не были простыми узкоспециализированными рекламными текстами, а несли и много систематизирующей информации, очень важной для понимания современных тенденций в биотехнологии.