Схема блока питания LKB Bromma 2140 (расположен на объединительной плате в блоке управления)
Имена деталей как на плате

При выборе колонки чаще всего поступают следующим образом:

Испытывают имеющуюся в распоряжении колонку;

Обращаются за советом к коллегам;

Проводят литературный поиск.

Для оптимизации хроматографического разделения проводят тщательный анализ полученных результатов и следуют нескольким проверенным практикой правилам:

Пики анализируемого компонента не разрешены (нет разделения).

Однажды был какой-то на удивление дурацкий день: у меня 2 раза в моем присутствии при фильтрации забивался фильтр и мигом его срывало к чертовой матери, в результате чего ренатурат капал даже с потолка, еще у одного здорового парня вдруг кровь пошла носом ну и так по мелочи. А еще у одного хроматографиста метод, который он перенес уже на десяток с лишним хроматографов, по непонятным причинам ни как не хотел воспроизводиться на очередном ВЭЖХ-хроматографе.

Хроматограф очень капризная штука: подавай ему все самое лучшее. А еще ему нужно электричество, тоже очень хоршего качества и, желательно, без перебоев. Об этом как-то многие или забывают или не придают особого значения. Но до тех пор пока горячий петух не клюнет, ну или особо деятельный электрик ни кого не предупредив в щиток полезет:). Так что об бесперебойном питании хроматографа желательно беспокоиться заранее.

Повышение давления в ВЭЖХ системе достаточно часто встречающаяся проблема. Причины могут быть разные и все их можно разделить на две основные группы:

1. засорение жидкостного тракта хроматографа 

2. загрязнение хроматографической колонки.

Проблема попадания воздуха в систему в жидкостной хроматографии достаточно часто возникает из-за множества причин, часть из них, а также примеры их устранения, приведена тут. Но недавно я столкнулся с тем, что воздуха в системе не наблюдается, а УФ-детектор «рисует» характерную картинку засушенной колонки (Рисунки 1 и 2 ).

Аффинная хроматография основана на строго специфическом взаимодействии связанных с сорбентом антител с антигеном. Благодаря этому аффинная хроматография достаточно широко применяется в биотехнологии, т.к. позволяет достаточно легко извлекать минимальные количества целевого вещества из больших объемов, зачастую очень сложных растворов. Но такая специфичность имеет и свою обратную сторону. Так если в катионообменной хроматографии в 90% случаев используют SP или CM Sepharose, то практически для любого белка можно получить несколько аффинных сорбентов с разной емкостью, специфичностью и т.д.

Вопрос достаточно мало рассматриваемый в литературе, но тем не менее очень злободневный в жидкостной хроматографии. Так, например, за прошедший месяц я тем или иным образом сталкивался с этим раза 4. То клапан сработает с запозданием то сам напортачил. Засохшую колонку опять же полежавшую во время жары при +30 в «холодной» комнате пришлось восстанавливать. Работаю на хроматографе без ловушки, так что единичные пузыри бывает залетают.

Потребовалась новая колонка. Бабульку, которая набивала их 30 лет сократили. Дал набить девочкам- выходы пиков ровно в 2 раза быстрее получились. В общем при помощи Супины и всего ненормативного словарного запаса пришлось учиться самому.